Что такое ПЦР-тесты?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) -это быстрый и высокоточный способ диагностики определенных инфекционных заболеваний и генетических изменений. Тесты работают путем обнаружения ДНК или РНК патогена (болезнетворного организма) или аномальных клеток в образце.

• DNA -это генетический материал, содержащий инструкции и информацию для всего живого.

• RNA - еще один тип генетического материала. Он содержит информацию, скопированную с ДНК и участвующую в создании белков.

Большинство вирусов и других патогенов содержат ДНК или РНК.

В отличие от многих других тестов, тесты ПЦР могут обнаружить признаки заболевания на самых ранних стадиях инфекции. Другие тесты могут пропустить ранние признаки заболевания, потому что в образце недостаточно вирусов, бактерий или других патогенов, или у вашего тела не было достаточно времени для выработки ответа антител. Антитела - это белки, вырабатываемые вашей иммунной системой для нападения на чужеродные вещества, такие как вирусы и бактерии. ПЦР-тесты могут выявить болезнь, когда в вашем организме очень мало патогенных микроорганизмов.

Во время ПЦР-теста небольшое количество генетического материала в образце копируется несколько раз. Процесс копирования известен как усиление. Если в образце присутствуют патогены, амплификация позволит их гораздо легче увидеть.

Как они используются?

ПЦР-тесты используются для:

• для диагностики некоторых инфекционных заболеваний

• для определения генетических изменений, которое могут вызвать болезнь

• для нахождения небольшого количество раковых клеток, которое могут быть пропущены при других типах тестов.

Как работает сервис?

ПЦР-тесты работают:

• Взятие пробы крови, слюны, слизи или ткани

• для определения генетических изменений, которое могут вызвать болезнь

• для нахождения небольшого количество раковых клеток, которое могут быть пропущены при других типах тестов

• Процесс копирования повторяется несколько раз. Примерно через час создаются миллиарды копий. Если присутствует вирус или патоген, это будет указано на машине.

Некоторые вирусы, включая COVID-19, состоят из РНК, а не ДНК. Для этих вирусов перед копированием РНК должна быть преобразована в ДНК.

ПЦР и rtPCR проверяют наличие возбудителя. Другой тип ПЦР, известный как количественная ПЦР (qPCR), измеряет количество патогенов в образце, qPCR можно проводить одновременно с PCR или rtPCR.

Что происходит во время теста ПЦР?

Есть разные способы получить образец для ПЦР-теста. Общие методы включают анализы крови и мазки из носа. Во время анализа крови медицинский работник возьмет образец крови из вены на руке с помощью небольшой иглы. После того, как игла будет введена, небольшое количество крови будет собрано в пробирку или флакон. Вы можете почувствовать легкое покалывание, когда игла входит или выходит. Обычно это занимает менее пяти минут.

Мазок из носа можно взять из передней части ноздрей (передних носовых ходов). Его также можно взять из задней части ноздрей в ходе процедуры, известной как мазок из носовых средних носовых раковин (NMT), или из носоглотки, верхней части носа и горла.

The COVID-19 RT-PCR Test is also designed to qualitatively detect SARS-CoV-2 nucleic acid in pooled samples using a matrix pooling strategy (i.e., Pooling Strategies) containing up to five separate upper respiratory tract swabs. (swabs from the nasopharynx, middle turbinate, anterior nose or oropharynx collected using separate vials containing the transport medium) per pool and 25 samples per matrix. Anterior nasal swab samples are collected in separate vials containing the transport medium, either under the supervision of a healthcare professional or independently using a home collection pcr test kit(home test kit) approved for use in this test.

Отрицательные результаты объединенного тестирования не следует рассматривать как окончательные. Если клинические признаки и симптомы пациента не соответствуют отрицательному результату или результаты необходимы для ведения пациента, тогда пациента следует рассмотреть для индивидуального тестирования. Образцы, включенные в пулы, где положительный образец не может быть идентифицирован с помощью матрицы, должны быть протестированы индивидуально, прежде чем сообщать о результате. Образцы с низкой вирусной нагрузкой могут не обнаруживаться в пулах образцов из-за пониженной чувствительности объединенного тестирования.

Результаты предназначены для идентификации SARS-CoV-2 RNA. РНК SARS-CoV-2 обычно обнаруживается в респираторных образцах во время острой фазы инфекции. Положительные результаты указывают на присутствие РНК SARS-CoV-2; Клиническая корреляция с историей пациента и другой диагностической информацией необходима для определения статуса инфекции. Положительные результаты не исключают бактериальную инфекцию или коинфекцию другими вирусами. Обнаруженный агент не может быть определенной причиной заболевания.

Отрицательные результаты не исключают заражения SARS-CoV-2 и не должны использоваться в качестве единственной основы для принятия решений по ведению пациентов. Отрицательные результаты должны быть объединены с клиническими наблюдениями, историей болезни и эпидемиологической информацией

ПЦР-тест на COVID-19 - это тест полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (рОТ-ПЦР) в реальном времени. Тест можно запустить в формате singleplex (три отдельных анализа для каждой из трех мишеней SARS-CoV-2) или объединить в одну реакцию (содержащую все 3 мишени SARS-CoV-2) и настроить амплификацию. В одноплексном формате тест использует три набора праймеров и зондов для обнаружения трех областей в гене нуклеокапсида (N) SARS-CoV-2 и один набор праймеров и зондов для обнаружения РНКазы P (RP) человека в клиническом образце.

При объединении в одну реакцию в тесте используются два набора праймеров и зондов для обнаружения двух областей в гене SARS-CoV-2 N и один набор праймеров и зондов для обнаружения RP. РНК, выделенная из образцов верхних и нижних дыхательных путей (например, мазков из носа, носоглотки или ротоглотки, мокроты, аспиратов из нижних дыхательных путей, бронхоальвеолярного лаважа и носоглоточного смыва / аспирата или назального аспирата), обратно транскрибируется в кДНК Flex7 и затем амплифицируется с помощью Applied Biosystems (QS7) прибор с версией ПО 1.3

В процессе амплификации зонд отжигается с определенной целевой последовательностью, расположенной между прямым и обратным праймерами. Во время фазы удлинения цикла ПЦР 5’-нуклеазная активность Taq-полимеразы разрушает связанный зонд, в результате чего репортерный краситель отделяется от красителя-тушителя, генерируя флуоресцентный сигнал. Интенсивность флуоресценции контролируется в каждом цикле ПЦР с помощью QS7.

Во время проверки передних ноздрей вы начнете с запрокидывания головы. Тогда вы или провайдер:

• Осторожно введите тампон в ноздрю.

• Поверните тампон и оставьте его на 10-15 секунд.

• Выньте тампон и вставьте его во вторую ноздрю.

• Сделайте мазок из второй ноздри, используя ту же технику.

Во время взятия мазка NMT вы начнете с запрокидывания головы. Тогда вы или ваш провайдер:

• Осторожно введите тампон в нижнюю часть ноздри, надавливая на него, пока не почувствуете, что он останавливается.

• Поверните тампон в течение 15 секунд.

• Выньте тампон и вставьте его во вторую ноздрю.

• Сделайте мазок из второй ноздри, используя ту же технику.

Есть ли риски для ПЦР-теста?

Риск сдачи анализа крови очень невелик. У вас может возникнуть легкая боль или синяк в месте введения иглы, но большинство симптомов быстро проходят.

Мазок из носа может пощекотать вам горло или вызвать кашель. Мазок из носоглотки может быть неудобным и вызывать кашель или рвоту. Все эти эффекты временные.

Что еще мне нужно знать о ПЦР-тестах?

ПЦР-тесты считаются лучшим и наиболее эффективным методом выявления многих инфекционных заболеваний, включая COVID-19 и Эбола. И поскольку они часто могут поставить диагноз до появления симптомов инфекции, тесты ПЦР играют решающую роль в предотвращении распространения заболеваний.